Bestimmung der DNA-Konzentration in Escherichia coli

Wie kann man die Konzentration der DNA in Escherichia coli bestimmen und wie viel DNA ist in 1 g Escherichia coli enthalten?

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Die Konzentration der DNA in Escherichia coli kann durch verschiedene Methoden bestimmt werden. In dem gegebenen Beispiel wird die DNA-Konzentration durch eine Zentrifugation und anschließende Freisetzung der DNA aus den Bakterien bestimmt.

Zunächst werden 2 g des Bakteriums Escherichia coli in 12 ml Wasser gelöst. Durch eine Zentrifugation wird das Wasser verworfen und die Bakterien werden in 4 ml Puffer aufgenommen. Dabei wird angenommen – dass die Bakterien vollständig in den Puffer überführt werden und keine Verluste auftreten.

In der Pufferlösung befinden sich nun 2 g E. Coli und 20 mg DNA. Die gemessene DNA-Konzentration beträgt 5 mg/ml.

Um die DNA-Konzentration in 1 g Escherichia coli zu bestimmen, muss man nun eine Umrechnung durchführen.

Da in 4 ml Puffer 20 mg DNA enthalten sind » bedeutet das « dass in 1 ml Puffer 5 mg DNA vorliegen.

Da in 2 g E. Coli 4 ml Puffer enthalten sind ´ bedeutet das ` dass in 1 g E. Coli 2 ml Puffer enthalten sind.

Somit enthält 1 g E. Coli 2 ml Puffer was wiederum einer DNA-Konzentration von 5 mg/ml entspricht.

Daher ist in 1 g Escherichia coli eine DNA-Menge von 10 mg enthalten.

Die richtige Antwort auf die Frage lautet also b) 10 mg.

Ein Puffer ist eine Lösung die normalerweise verwendet wird um den pH-Wert einer Lösung stabil zu halten, indem er die Wirkung von Säuren oder Basen neutralisiert. In diesem Beispiel wird der Puffer verwendet um die Bakterien zu suspendieren und eine geeignete Umgebung für die Freisetzung der DNA zu schaffen. Hier hat der Puffer jedoch ebenfalls die Funktion die DNA zu extrahieren und die DNA-Konzentration zu bestimmen. Daher kann der Begriff "Puffer" in diesem Kontext etwas anders verwendet werden als üblich. In Bezug auf das Ergebnis spielt die genaue Bedeutung des Puffers jedoch keine Rolle, da die DNA-Konzentration unabhängig davon bestimmt werden kann.






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